摘要
目的 探讨黑炭与铅联合暴露对大鼠脉络丛上皮细胞系Z310细胞中细胞黏附分子表达和调控细胞黏附分子的微小RNA(miRNA)影响。方法 (1)将Z310细胞随机分为对照组、黑炭暴露组、铅暴露组和联合暴露组,铅暴露组、黑炭暴露组细胞分别予剂量为10μmol/L的乙酸铅和10 mg/L的黑炭染毒,联合暴露组予上述剂量的黑炭与乙酸铅染毒;12.0 h后,采用蛋白印迹法检测Z310细胞中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、黏膜血管地址素细胞黏附分子-1(MAdCAM-1)的蛋白表达,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测调控ICAM-1基因的miR-326、miR-328-3p和miR-542-3p的表达。(2)将Z310细胞或miRNA-326 mimic转染成功的Z310细胞随机分为对照组、miRNA-326转染对照组、联合暴露组和miRNA-326转染联合暴露组,2个对照组细胞均不予染毒处理,2个联合暴露组均予剂量为10 mg/L的黑炭染毒和10μmol/L的乙酸铅染毒12.0 h,采用蛋白印迹法检测ICAM-1的蛋白表达。结果 (1)黑炭暴露组细胞中的ICAM-1、VCAM-1、MAdCAM-1和铅暴露组细胞中ICAM-1蛋白相对表达水平均高于对照组(P值均<0.05);联合暴露组细胞中ICAM-1和MAdCAM-1蛋白相对表达水平分别高于其余3组(P值均<0.05),VCAM-1蛋白相对表达水平均高于对照组和铅暴露组(P值均<0.05)。黑炭暴露组和铅暴露组细胞中miR-326相对表达水平均低于对照组(P值均<0.05),联合暴露组细胞中miR-326相对表达水平分别低于其余3组(P值均<0.05);4组细胞中miR-328-3p和miR-542-3p相对表达水平比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05)。(2)ICAM-1蛋白相对表达水平在miR-326转染对照组细胞中低于对照组(P<0.05),在联合暴露组、miR-326转染联合暴露组细胞中均高于对照组和miR-326转染对照组(P值均<0.05),在miR-326转染联合暴露组细胞中低于联合暴露组(P<0.05)。结论 黑炭与铅单独暴露均可导致Z310细胞中ICAM-1、VCAM-1、MAdCAM-1表达不同程度的上调;黑炭与铅联合暴露对ICAM-1和MadCAM-1表达上调具有协同作用,以ICAM-1变化最为显著。黑炭与铅联合暴露可能通过下调miR-326表达进而上调ICAM-1蛋白的表达。
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单位公共卫生学院; 华北理工大学