摘要

目的研究鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium, ST)外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs)对树突状细胞(dendritic cells, DC)超微结构及免疫功能的影响。方法无菌取小鼠骨髓细胞,体外经重组鼠源粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(recombinant mouse granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, rm GM-CSF)和重组鼠源白细胞介素-4(recombinant mouse interleukin-4, rm IL-4)联合诱导扩增出DC,倒置相差显微镜下观察细胞形态,流式细胞术鉴定表型;超速离心分离获取ST-OMVs,CCK-8法测其对DC存活情况的影响,确定OMVs刺激浓度;透射电镜观察细胞负载OMVs后超微结构特征;流式细胞术检测DC细胞因子分泌、表面分子表达、吞噬能力。结果体外诱导和扩增的DC具有典型的细胞形态,纯度达85%以上,透射电镜可见DC表面有大量丝状伪足;OMVs负载后,可见DC表面树突状结构减少,胞浆内有大量囊泡状结构,线粒体增多,肿胀以及细胞凋亡;OMVs 5μg/mL和10μg/mL处理后,DC吞噬能力下降(P<0.05),成熟表型特征性分子表达上调(P<0.05),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)表达升高(P<0.05)。结论 ST-OMVs可诱导DC分泌TNF-α和IL-1β,具有促进DC成熟和抗原提呈的能力。