一种米曲霉耐盐蛋白酶的纯化及酶学性质分析

作者：毛丙永; 刘艳凤; 赵国忠; 崔树茂; 赵建新^*

来源：食品科学, 2018, 39(24): 78-84.

• 米曲霉
• 蛋白酶
• 纯化
• 酶学性质

采用硫酸铵沉淀、Q-HP阴离子交换柱和Superdux 75凝胶柱等技术,从酱油大曲中纯化得到一种耐盐蛋白酶,经飞行时间质谱鉴定为钙蛋白酶RIM13,属于一种半胱氨酸蛋白酶。该蛋白酶的最适温度为50℃;最适pH值为6.5;稳定温度为40℃;稳定pH值为7.0;Mn2+促进蛋白酶活力,Fe3+、Fe2+、Cu2+、Ca2+、K+、Na+抑制蛋白酶活力,以上金属离子对蛋白酶二级结构也产生不同程度的影响;米氏常数Km为2.43 g/L,最大反应速率Vm为103.09 mg/(L·min)。在5、10 g/100 mL和15 g/100 mL的NaCl质量浓度条件下,蛋白酶保留的酶活力分别为77.22%、54.39%以及41.15%。该蛋白酶在高盐度环境下保持较高的酶活力,因此具有潜在的工业应用价值。

• 单位
  天津科技大学; 江南大学