鳗鲡疱疹病毒与鳗鲡圆环病毒双重PCR检测方法的建立

作者：林而舒; 卓玉琛; 陈斌; 林煜; 钟全福; 樊海平; 曾占壮

来源：福建农业学报, 2022, 37(11): 1394-1399.

DOI：10.19303/j.issn.1008-0384.2022.011.004

• 鳗鲡疱疹病毒
• 鳗鲡圆环病毒
• 双重PCR
• 检测方法

【目的】建立能同时检测鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus, AHV)与鳗鲡圆环病毒(Eel circovirus,EeCV)的双重PCR法。【方法】优选PCR引物组合，建立鳗鲡疱疹病毒与鳗鲡圆环病毒的双重PCR检测方法，探究双重PCR扩增条件，并检验该方法的特异性、灵敏性和临床样品检测效果。【结果】双重PCR法同时扩增出鳗鲡疱疹病毒690 bp和鳗鲡圆环病毒338 bp特异性片段，与猪圆环病毒(Porcine circovirus)、鸭圆环病毒(Duck circovirus)、锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus)和鲤疱疹病毒(Cyprinid herpesvirus)的核酸不发生扩增反应。鳗鲡疱疹病毒和鳗鲡圆环病毒重组质粒标准品的最低全检出量为5.0×10-4μg·mL-1。用所建立的双重PCR方法对50份临床病鳗进行检验，其中鳗鲡疱疹病毒的感染率为16%，鳗鲡圆环病毒的感染率为68%，共感染率为8%。该感染率与单一PCR检测结果完全一致。【结论】建立的鳗鲡疱疹病毒和鳗鲡圆环病毒双重PCR检测法不仅特异性强、灵敏度高、重复性好，而且临床应用效果佳，为鳗鲡疱疹病毒和鳗鲡圆环病毒的快速检测提供了有效的技术支持。

• 单位
  福建省淡水水产研究所