摘要

目的评价Rho亚家族蛋白A/相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(RhoA/ROCK2)信号通路在异丙酚诱发新生大鼠海马神经元凋亡中的作用。方法实验Ⅰ原代培养大鼠海马神经元,以1×106个/ml密度接种于6孔培养板中,采用随机数字表法分为2组(n=6):溶剂对照组(C组)和异丙酚组(P组)。P组加入异丙酚终浓度60μg/ml;C组加入二甲基亚砜终浓度0.04%。于孵育24h时,Western blot法检测海马神经元RhoA和ROCK2的表达水平。实验Ⅱ原代培养大鼠海马神经元,以1×106/ml的密度接种于6孔培养板中,采用随机数字表法分为3组(n=6):溶剂对照组(C组)、异丙酚组(P组)和异丙酚+RhOA/ROCK2信号通路特异性阻断剂Y27632组(P+Y组)。P组加入异丙酚终浓度60μg/ml,P+Y组加入终浓度为60μg/ml的异丙酚和终浓度为10μmol/L的Y27632,C组加入二甲基亚砜终浓度0.04%。于孵育24 h时,采用流式细胞术测定海马神经元凋亡率;采用Western blot法检测海马神经元活化的caspase-3的表达。结果实验Ⅰ与C组比较,P组海马神经元RhoA和ROCK2的表达上调(P<0.05)。实验Ⅱ与C组比较,P组和P+Y组海马神经元凋亡率升高,活化的caspase-3表达上调(P<0.05或0.01);与P组比较,P+Y组海马神经元凋亡率降低,活化的caspase-3表达下调(P<0.05)。结论 RhoA/ROCK2信号通路的激活参与了异丙酚诱发新生大鼠海马神经元凋亡的过程。

  • 单位
    河北医科大学第二医院