抗水稻黑条矮缩病毒三价RNAi表达载体的构建及转基因水稻的培育

作者：赵成金; 林艳虹; 瞿绍洪; 杨秀芬; 曾洪梅; 邱德文; 郭立华

来源：分子植物育种, 2014, 12(05): 853-858.

DOI：10.13271/j.mpb.012.000853

• RBSDV
• RNA干扰
• 转基因水稻
• Gateway技术

水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)不同双链RNA片段的三价RNAi(RNA interference)表达载体在转基因水稻中的研究尚未见报道。本研究以RBSDV已报道不同双链RNA序列为基础,设计了针对S2、S6、S10三个基因共605 bp的RNAi靶序列,通过基因合成的方法获得相应的目的片段。利用Gateway~ LR ClonaseTM Ⅱ Enzyme Mix的LR反应将目的基因构建到RNAi载体pBDL03中,然后通过农杆菌转化法转到水稻品种泰粳394中。通过PCR和荧光验证共获得45株阳性苗。T1代植株RBSDV抗性鉴定结果证实针对S2、S6和S10基因的三价RNA沉默载体对RBSDV具有良好的抗性。本研究结果为利用RNAi技术进行植物抗病毒研究奠定了基础。

• 单位
  浙江省农业科学院; 植物病虫害生物学国家重点实验室; 中国农业科学院植物保护研究所