间接酶联免疫吸附法测定血液中抗西尼罗河病毒单克隆抗体MIL94浓度及其应用

作者：相亚楠; 王灵超; 高尤; 罗龙龙; 张文鹏; 庄笑梅^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2021, 35(03): 194-200.

• 抗西尼罗河病毒
• 单克隆抗体
• 间接酶联免疫吸附法
• 食蟹猴
• 药动学

目的建立食蟹猴血清中抗西尼罗河病毒单抗MIL94的间接酶联免疫吸附(ELISA)定量测定法,并进行食蟹猴体内药动学初步研究。方法抗原包被量为每孔100 ng,酪蛋白封闭液于37℃孵育1 h,血清样品用PBS进行前处理,二抗按1∶10 000稀释,3,3′,5,5′-四甲基联苯胺溶液室温显色10 min,硫酸终止反应。12只食蟹猴随机分为2组,每组6只,分别30 min内静脉推注MIL94 5和100 mg·kg-1,不同时间点(1 h～56 d)采血,分离血清,ELISA法测定血清中MIL94浓度。WinNonlin软件计算药动学参数,分析药动学特征。结果该方法的线性范围为0.25～32 mg·L-1,板内精密度1.18%～4.62%,板间精密度8.19%～10.20%。食蟹猴静注MIL94 5和100 mg·kg-1,半衰期分别为8±5和(8±5)d,清除率(Cl)分别为0.25±0.08和(0.26±0.009)m L·h-1·kg-1,稳态表观分布容积分别为55±21和(74±19)m L·kg-1,药时曲线下面积(AUC)分别为951.2±393和(18030±6139)d·mg·L-1,AUC与剂量成正比,Cl不随剂量改变而改变。结论建立的间接酶联免疫吸附法的灵敏度、特异性、线性范围、精密度和稳定性等均满足临床前药动学研究需求。初步获得了MIL94在5～100 mg·kg-1的静注剂量范围内,食蟹猴体内的线性药动学特征,为MIL94的研发提供支持。

• 单位
  药物研究所