耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因检测的LAMP方法建立

作者：陈凤华; 欧红玲; 吴丽芬; 王岩; 白静; 张巧云; 马盈盈; 王欣茹

来源：西北国防医学杂志, 2015, 36(10): 657-660.

DOI：10.16021/j.cnki.1007-8622.2015.10.010

• 实验室诊断
• 环介导等温扩增技术
• 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
• 快速检测

目的:探讨环介导等温扩增技术(LAMP)检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)mecA特异性基因的可行性和可靠性。方法:建立LAMP反应体系,优化反应条件,进行灵敏度和特异性试验。结果:LAMP反应检测mecA基因的最佳引物组为引物组2+环引物1,最佳反应温度为62℃,LAMP检测mecA基因的最低限为14.7pg/μl,PCR检测mecA基因的最低限为147pg/μl(引物量与LAMP一致),敏感性较PCR高10倍。LAMP检测mecA基因的特异度为100%,假阳性率为15%,假阴性率为0。结论:LAMP是一种操作简单、检测灵敏度和特异度高的扩增方法,仅靠检测mecA基因来鉴别MRSA假阳性率高,需结合金黄色葡萄球菌特异nuc基因同时扩增鉴定效果最好。

• 单位
  天津医科大学总医院; 中国人民解放军第二炮兵总医院