多房棘球绦虫主要卵抗原重组蛋白的制备及其在免疫诊断中的初步应用

作者：张军梅; 李瑞; 陈晓倩; 何学东; 王正荣; 郑亚东; 胡俊杰^*; 郭小腊^*

来源：中国兽医科学, 2021, 51(05): 588-593.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0073

• 多房棘球绦虫
• 主要卵抗原
• 免疫组织定位
• 免疫诊断

通过对多房棘球绦虫(Echinococcus multiloculais)主要卵抗原(Em MEA)基因的表达、抗体制备及血清ELISA检测,初步评价其作为诊断抗原的价值。根据WormBase数据库Em MEA基因序列设计引物,利用RT-PCR扩增Em MEA基因并构建重组表达质粒,诱导表达、纯化重组蛋白Em MEA;制备Em MEA多克隆抗体并进行免疫组织定位;ELISA方法检测Em MEA重组抗原的敏感性和特异性。结果表明,Em MEA基因长度为957 bp,编码319个氨基酸,与其它绦虫中同源蛋白的氨基酸相似性为90.85%～96.93%。Em MEA重组蛋白约为40 ku,制备的多克隆抗体可识别虫体天然Em MEA蛋白,抗体效价达1∶25 600;Em MEA蛋白仅分布于原头蚴体壁。ELISA检测表明,Em MEA重组抗原和虫体天然抗原的特异性均为100%,Em MEA重组抗原的敏感性(100%)优于虫体天然抗原的敏感性(95.83%)。结合以上研究结果,Em MEA抗原具有作为多房棘球蚴病诊断抗原的潜能。

• 单位
  新疆农垦科学院畜牧兽医研究所; 甘肃农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室