猴T淋巴细胞趋向性病毒l型RPA和荧光RPA检测方法的建立

作者：熊炜; 林颖峥^*; 魏晓锋; 陈鸿军; 张强; 王艳; 李健

来源：实验动物科学, 2019, 36(02): 33-37.

• 猴
• 猴T淋巴细胞趋向性病毒l型
• RPA技术
• 荧光RPA

目的为了提高口岸对进出境野生及实验用灵长类动物猴T淋巴细胞趋向性病毒l型(Simian T-cell lymphotropic virus type 1, STLV-1)感染情况的监测和流行病学调查,本研究建立了重组酶聚合酶扩增(RPA)和荧光RPA检测STLV-1的方法。方法使用软件分析不同国家和地区分离的STLV-1的gag蛋白(gag polyprotein)基因序列,设计RPA引物和探针,建立RPA和荧光RPA检测STLV-1的方法,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行验证。结果通过将猴其它特定病原体与STLV-1对比检测,证实建立的检测方法具有良好的特异性;通过敏感性试验,证实建立的RPA和荧光RPA方法检测下限与PCR一致;通过对30份STLV-1阳性和阴性核酸样本的检测,证实建立的RPA和荧光RPA方法,具有PCR方法一样的稳定性和可靠性。结论本研究建立的RPA和荧光RPA检测STLV-1的方法具有良好的特异性、敏感性和可靠性,可应用于STLV-1的监测和流行病学调查。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 上海出入境检验检疫局; 上海实验动物研究中心