人骨肉瘤细胞适配体的早期筛选

作者：王华; 梁骥; 高远; 孙娜; 马艳; 高丽君; 夏薇

来源：北华大学学报(自然科学版), 2015, 16(03): 311-315.

• 人骨肉瘤
• Cell-SELEX技术
• 适配体

目的体外随机合成单链寡核苷酸备选文库,以骨肉瘤U-2 OS完整细胞作为靶点,筛选出与其结合的高特异性、高亲和性单链DNA(ss DNA).方法将体外合成随机碱基序列的单链DNA文库与人骨肉瘤U-2 OS细胞相结合,收获与靶细胞结合的单链DNA,通过优化PCR条件进行大量扩增后,应用生物素-链霉亲和素亲和层析柱分离出正链DNA.结果以10,14以及18个循环时扩增ds DNA产物最理想;应用生物素-链霉亲和素磁珠分离法制备的正链ss DNA纯度高,可有效保证次级文库的筛选.结论应用Cell-SELEX技术可成功筛选早期ss DNA文库,为后续获得针对人骨肉瘤U-2 OS细胞的高特异性适配体奠定实验基础.

• 单位
  北华大学; 第一临床学院; 吉林大学; 北华大学附属医院