摘要
目的通过构建氧葡萄糖剥夺/再恢复(OGDR)神经母细胞瘤细胞模型,探讨miR-448在脑缺血再灌注引起的神经元细胞损伤中的作用及机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,构建OGDR细胞模型模拟脑缺血/再灌注损伤,荧光定量PCR检测miR-448的表达;预转染阴性对照(NC)或者miR-448 inhibitor,并进行OGDR处理,CCK8法检测细胞活力、流式细胞仪法检测凋亡和Western印迹检测蛋白的表达情况。结果 miR-448的表达水平在OGDR组的SH-SY5Y细胞中显著升高,表达水平为正常组的8.49倍。与转染NC组相比,转染miR-448 inhibitor后SH-SY5Y细胞中miR-448的表达水平显著降低,抑制率为83%。与NC预转染相比,miR-448 inhibitor预转染可明显增加OGDR处理条件下SH-SY5Y细胞的存活率,降低凋亡水平,降低Bax的表达水平,并增加Bcl-2的表达水平。另外,与正常培养组相比,miR-448靶基因SIRT1在OGDR处理的SH-SY5Y细胞中的表达水平明显降低。与NC预转染相比,miR-448 inhibitor预转染可明显增加SIRT1的表达水平。结论 OGDR可诱发miR-448高表达,miR-448 inhibitor预转染可明显抑制OGDR诱导的细胞损伤。因此,miR-448可能成为脑缺血再灌注引起的神经元细胞损伤的潜在治疗靶点。