摘要
[目的]构建汉坦病毒S片段标准品,并建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量PCR方法检测汉坦病毒核酸.[方法]对76-118株的S片段基因进行序列分析,利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针,逆转录为cDNA,经PCR扩增,产物纯化后与PMD 18-TVector连接,转化到大肠杆菌DH5α,筛选得到标准品的质粒,提取质粒并进行定量.在S片段的保守区设计引物和TaqMan探针,对
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单位上海市疾病预防控制中心; 复旦大学