人卵透明带蛋白huZP3a~(22～176)和huZP3b~(177～348)肽段在大肠杆菌中的表达及其纯化

作者：徐万祥; 何亚萍; 洪爱真; 季朝能; 钱吉; 王曙; 谢毅; ElviraHinsch; Klaus-DieterHinsch

来源：生殖与避孕, 2004, (03): 143-148.

• 人透明带蛋白-3
• 基因表达
• 免疫印迹
• 纯化 human zona pellucida-3
• gene expression
• western blot analysis
• purification

目的:探索将huZP3a22~348蛋白编码基因拆分成两段,分别表达的可行性,并研究表达产物的免疫原性。方法:用PCR技术, 将去N-端信号肽和C-端跨膜区的huZP322~348蛋白编码基因拆成大小相近的两段, 以完整阅读框的形式分别重组插入热诱导型pBV221的多克隆区。结果:大肠杆菌分别特异地表达了可单独或复合应用的huZP3a22~176和huZP3b177~348,在经过抗人ZP3不同抗原区合成肽抗体的蛋白印迹鉴定后, 用改良的制备性PAGE方法分离纯化这两种表达产物。同时用兔抗猪ZP IgGs蛋白印迹试验表明, huZP3a和pZP3b的几个共同线性抗原表位都存在于其肽链的前半区域...

• 单位
  遗传工程国家重点实验室; 上海市计划生育科学研究所; 复旦大学