摘要

目的 使用高效液相色谱法(HPLC)和解吸电喷雾电离-离子化质谱成像(DESI-MSI)法研究不同生长年限黄连次生代谢产物的动态积累及分布规律。方法 以一、三、五年生黄连为研究对象,采用HPLC法对黄连次生代谢产物的7种指标性成分(盐酸药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、木兰花碱)进行含量测定。同时,利用DESI-MSI法对一、三、五年生黄连切片的7种成分的分布进行定性分析。结果 HPLC法测定结果显示,盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸药根碱、非洲防己碱、木兰花碱在五年生黄连中含量最高;盐酸黄连碱与表小檗碱在三年生黄连中含量最高,而木兰花碱与盐酸药根碱在三年生黄连中含量最低;盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、非洲防己碱、表小檗碱及盐酸黄连碱均在一年生黄连中含量最低。DESI-MSI法测定结果显示,生物碱的盐酸盐在质谱分析过程中解离,最终以原型形式呈现。小檗碱和表小檗碱集中分布于整个黄连切片断面,且一年生分布区域最小、三年生和五年生分布区域相近;药根碱和非洲防己碱分布于皮部和髓部,且以五年生分布区域最大;巴马汀和黄连碱分布于皮部和髓部,一年生分布区域最小;木兰花碱仅分布于木部,且在一、三、五年生黄连中分布区域相近。结论 一年生黄连中各成分累积较少,第一年为黄连生长发育的主要阶段;三年生黄连中各成分累积较多,1~3年是黄连次生代谢产物累积的主要时期;五年生黄连中总成分含量最高,尤其是小檗碱累积最多,与以栽培5年以上的黄连为药材的市场习惯相符合。