反应体系混匀与否对新型冠状病毒实时荧光逆转录聚合酶链反应检测结果的影响

作者：杨志; 秦冬梅^*; 周波; 肖光军

来源：临床医药实践, 2022, 31(11): 824-827.

DOI：10.16047/j.cnki.cn14-1300/r.2022.11.017

• 新型冠状病毒
• 逆转录聚合酶链反应
• 检测结果

目的：探讨反应体系混匀与否对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测结果的影响。方法：两种不同逆转录时长的实时荧光PCR法试剂均按以下方法处理。试剂盒内自带的阳性对照用生理盐水配制成稀释度为1∶1,1∶10,1∶100三个浓度水平的试验样本。每个浓度水平的样本检测16次，其中8次的混匀体系先混匀再瞬离后上机检测(混匀组),而另外8次的反应体系则直接瞬离后上机检测(非混匀组),检测结果以阈值循环数(Ct值)表示。比较每个浓度水平混匀组与非混匀组的结果差异。当组间差异具有统计学意义时，则进一步分析差异有无临床意义(实际意义),当两组的均值之差在0.5以内，则认为差异无临床意义。结果：对于逆转录时间较长的试剂，各浓度水平组间差异均无统计学意义(P>0.05);对于逆转录时间较短的试剂，部分组间差异具有统计学意义(P<0.05),但无临床意义(组间均值之差在0.5以内)。结论：用实时荧光RT-PCR法检测新型冠状病毒核酸时，反应体系混匀与否对检测结果无影响。

• 单位
  大英县人民医院; 遂宁市中心医院