免疫组织化学切片行EBER原位杂交检测方法的建立及应用

作者：滕孝静; 程鸣; 周贺; 王照情; 陈光勇^*

来源：临床和实验医学杂志, 2023, 22(15): 1660-1664.

• 原位杂交
• EB病毒
• RNA
• 免疫组织化学
• 淋巴瘤

目的 在石蜡组织免疫组织化学(IHC)阴性切片上建立EBER原位杂交(ISH)检测方法，为EB病毒相关淋巴组织病变在组织资源不足的情况下提供及时有效的检测结果及诊断依据。方法 回顾性收集首都医科大学附属北京友谊医院病理科2021年1月至2023年2月间EBER原位杂交检测阳性的病例23例，其中NK/T细胞淋巴瘤8例，弥漫大B细胞淋巴瘤6例，伯基特淋巴瘤2例，经典霍奇金淋巴瘤4例，传染性单核细胞增多症3例。先选取1例组织量充足的EB病毒阳性弥漫大B细胞淋巴瘤组织用于IHC后EBER ISH前组织预处理条件的摸索，然后使用最佳预处理条件建立本实验的检测流程并用于另外22例组织中。22个蜡块每例连续切片2张，1张进行常规的EBER原位杂交检测，归为对照组；另1张归为实验组，先进行IHC染色，再按最佳预处理条件进行EBER原位杂交。最后对两组切片杂交的成功率、阳性强度、阳性细胞比例及组织细胞结构进行观察对比。结果 实验组EBER杂交的成功率为90.91%(20/22),与对照组[100%(22/22)]相比，差异无统计学意义(P>0.05),杂交成功的切片阳性着色位于细胞核，定位准确，背景干净。两组切片的阳性细胞比例差异无统计学意义(P>0.05)。染色强度上，对照组中8例评分为3分的组织在实验组评分为2分，使两组染色强度的对比差异有统计学意义(P<0.05),但杂交结果仍可清晰明确地判读。实验组与对照组切片均未出现组织脱片、细胞形态结构不完整的现象。结论 本文建立的IHC-EBER原位杂交检测方法操作简单、定位准确、成功率高、结果准确，可有效解决患者因切片或组织资源不足而无法进行EBER原位杂交检测的难题，能够为EB病毒相关淋巴组织疾病提供及时有效的诊断依据，具有临床实用价值，值得推广。

• 单位
  首都医科大学附属北京友谊医院