蛋白酶体抑制剂Oprozomib对顺铂耐药卵巢癌细胞的作用及机制研究

作者：任方芳; 赵太强^*

来源：解放军医学杂志, 2020, 45(04): 405-410.

• 卵巢癌
• 顺铂耐药
• 活性氧簇
• 蛋白酶体抑制剂

目的探讨蛋白酶体抑制剂Oprozomib (OZ)对顺铂(DDP)耐药卵巢癌细胞的作用,并初步揭示其机制。方法体外培养DDP耐药卵巢癌细胞SKOV3/DDP、A2780/DDP,传代后选取对数生长期细胞进行实验。研究OZ对耐药卵巢癌细胞活力的影响时,OZ浓度设为0、3、9、27、81、243、729、2181、6561 nmol/L,与细胞共培养;研究DDP对耐药卵巢癌细胞活力的影响时,DDP浓度设为0、3、9、27、81、243、729、2181、6561 nmol/L,另加入125 nmol/L OZ,采用CCK-8法检测细胞活力;采用流式细胞术检测DDP+OZ联用时的细胞凋亡情况。将实验分为对照组和OZ组,检测OZ对蛋白酶体糜蛋白酶(CT-L)活性和谷胱甘肽(GSH)合成的影响;采用Western blotting检测胞内谷胱甘肽合成酶(GSS)蛋白的表达。将实验分为对照组、DDP组、OZ组、DDP+OZ、DDP+OZ+GSH组和DDP+OZ+Tempol组,检测胞内活性氧簇(ROS)水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 OZ对SKOV3/DDP、A2780/DDP细胞的IC50分别为140、350 nmol/L;与OZ联用时,DDP在两株细胞中的IC50分别为154、232 nmol/L。DDP+OZ联用时,两株细胞凋亡率均明显升高(P<0.01)。OZ可抑制蛋白酶体CT-L活性,并呈剂量依赖性。OZ可抑制胞内GSH合成及GSS蛋白表达(P<0.01),GSH水平降低导致ROS清除受阻,ROS清除剂Tempol可明显降低胞内ROS水平(P<0.05,P<0.01)。Tempol对DDP+OZ诱导的细胞凋亡具有明显抑制作用(P<0.01)。结论 OZ通过抑制GSH生成阻碍胞内ROS清除,进而增强SKOV3/DDP和A2780/DDP细胞对DDP的敏感性。

• 单位
  四川省人民医院; 四川省医学科学院