摘要

目的观察积雪草酸对健康人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)增殖、凋亡及成骨分化的作用,探究其作用机制。方法采用不同浓度积雪草酸处理健康hPDLCs,CCK8法检测不同时间点积雪草酸对hPDLCs的增殖能力的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色检测细胞成骨分化情况,qRT-PCR法检测细胞ALP、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白2(bone morphogenic protein 2,BMP2)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator nuclear factorκB ligand,RANKL)mRNA表达水平;Western blotting法检细胞中B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein gene,Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(proteinkinase B,Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平。结果与对照组比较,不同浓度积雪草酸对hPDLCs增殖和凋亡无显著影响。在成骨诱导条件下,与对照组比较,不同浓度积雪草酸可提高ALP、Runx2、OCN、BMP2 mRNA表达,减少RANKL mRNA表达,上调PI3K和Akt磷酸化水平,其中50μg/mL积雪草酸的效果最佳。结论 100μg/mL以下积雪草酸对健康h PDLCs增殖和凋亡无影响,但可促进hPDLCs成骨分化能力,其作用机制可能与激活PI3K/AKT通路有关。