外源性重组HMGB1对神经干细胞增殖分化的影响及其机制研究

作者：张会敏; 吴波; 曹甜; 严玉颖; 刘鸣

来源：四川大学学报（医学版）, 2017, 48(03): 394-398+409.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2017.03.014

• 神经干细胞
• 重组高迁移率组蛋白B1
• 晚期糖基化终末产物受体
• Toll样受体
• 基质金属蛋白酶9
• 神经生长因子

目的研究外源性重组高迁移率组蛋白B1(HMGB1)对神经干细胞增殖及分化的影响及其作用机制。方法在无血清的神经干细胞培养基中培养SD鼠大脑皮层细胞,传代扩增及纯化神经干细胞,免疫荧光检测神经干细胞标记物巢蛋白(nestin),分析神经干细胞纯度。CCK-8测定加入不同浓度的重组HMGB1对神经干细胞增殖活性的影响,选择重组HMGB1的最适浓度进行后续实验;细胞免疫荧光检测重组HMGB1对神经干细胞分化的影响,Real-time PCR检测晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA、Toll样受体(TLRs)mRNA、基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA、神经生长因子(NGF)mRNA的表达,Western blot检测RAGE、TLRs、MMP-9、NGF蛋白的表达。结果大鼠大脑皮层细胞在培养至第3代时,nestin鉴定神经干细胞纯度可达99%及以上。在重组HMGB1 10ng/mL刺激下,神经干细胞增殖活性最高。实验组神经Ⅲ类β-微管蛋白(TUJ1)表达高于对照组(P<0.05),实验组RAGE、TLRs、MMP-9、NGF mRNA及蛋白表达均高于对照组(P<0.05)。结论外源性重组HMGB1或可通过RAGE、TLRs、MMP-9等信号通路促进神经干细胞增殖及其向神经元方向分化。

• 单位
  四川大学华西医院; 神经内科