应用RD-PCR技术构建溶藻弧菌的cDNA文库

作者：王蓓; 吴灶和; 简纪常; 鲁义善

来源：水产学报, 2007, (06): 731-736.

• 溶藻弧菌
• cDNA文库
• 限制性显示PCR Vibrio alginolyticus
• cDNA library
• restriction display-PCR(RD-PCR)

应用限制性显示PCR(RD-PCR)技术构建溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库,筛选,收集巧妙地解决了由于细菌mRNA poly(A)化位点的高度多态性、用常规方法构建原核cDNA文库所遇到的文库大量重复冗余的难题。并进行筛选、收集cDNA片段进行测序,根据测序结果进行生物信息学分析和结果验证。实验结果表明,我们成功地构建了溶藻弧菌poly (A)化mRNA的cDNA文库,获得一百多个基因片段并对其中53个基因片段进行测序分析,获得了如细菌Ⅲ型分泌系统易位蛋白、趋药性传感器、类丝氨酸蛋白酶等毒力相关因子的基因片断。并且在一定程度上证实了poly(A)化在细菌中不是个别和偶然的现象。...

• 单位
  广东省教育厅; 广东海洋大学