双重实时荧光定量PCR检测产志贺毒素大肠埃希菌stx_1和stx_2基因

作者：赵爱兰; 孟琼; 白向宁; 刘学通; 刘凯; 熊衍文

来源：临床检验杂志, 2013, (04): 241-244.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2013.04.006

• 产志贺毒素大肠埃希菌
• 实时荧光定量聚合酶链反应
• 志贺毒素 Shiga toxin-producing Escherichia coli
• quantitative real-time PCR
• Shiga toxin

目的建立一种检测产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)的双重实时荧光定量PCR法。方法根据stx1和stx2及其变种序列,设计PCR引物和TaqMan探针,建立双重实时荧光定量PCR检测体系,进行灵敏度和特异性评价,并对STEC模拟粪便标本及动物粪便标本进行检测分析。结果双重实时荧光定量PCR检测含志贺毒素基因重组质粒的灵敏度为1×102copies/反应体系;该法对17种常见肠道病原菌均无特异性扩增,对47株不同志贺毒素类型及变种的已知STEC菌株的检测特异性为100%;对模拟粪便标本的检测下限为3.55×103CFU/g;对动物粪便标本的检测阳性率高于细菌分离培养。结论建立的双重实时荧光定量PC...

• 单位
  中国疾病预防控制中心传染病预防控制所; 传染病预防控制国家重点实验室