摘要

目的:研究1种新的校正方法—单点校正在桑叶一测多评(QAMS)中的应用。方法:采用HPLC检测,使用Lubex Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长350 nm,柱温30℃。以绿原酸为内参物,通过斜率校正、多点校正和单点校正分别建立新绿原酸、隐绿原酸、芦丁、异槲皮苷、烟花苷、乙酰异槲皮苷、紫云英苷、异绿原酸A、异绿原酸C、乙酰紫云英苷与绿原酸之间的相对校正因子,并考察其重现性。分别采用外标法、标准曲线法和一测多评(斜率校正、多点校正和单点校正)检测桑叶中11个成分的含量,并比较5种方法之间的差异。另外采用两点校正法配合相对保留时间计算校正方程,并对待测成分进行色谱峰定位。结果:新绿原酸、隐绿原酸、芦丁、异槲皮苷、烟花苷、乙酰异槲皮苷、紫云英苷、异绿原酸A、异绿原酸C、乙酰紫云英苷相对于绿原酸的校正因子分别为0.987、0.979、1.179、1.568、1.126、1.446、1.533、1.301、1.288、1.409(单点校正法)。相对校正因子在不同条件下重现性良好(RSD<3%)。一测多评(单点校正法)测得10批桑叶中上述11个成分含量分别为0.377~0.889、2.522~10.567、0.576~1.484、0.542~2.252、0.810~3.870、0.175~0.907、0.571~3.795、0.274~1.333、0.154~0.560、0.141~0.245、0.236~1.726 mg·g-1,与外标法测定结果完全一致。两点校正和相对保留时间单一应用均无法实现色谱峰的准确定位,但二者结合可实现色谱峰的精准定位(相对误差RE<2%)。结论:以绿原酸为内参物,同时测定桑叶中新绿原酸、隐绿原酸、芦丁、异槲皮苷、烟花苷、乙酰异槲皮苷、紫云英苷、异绿原酸A、异绿原酸C、乙酰紫云英苷含量的QAMS准确可行,可用于桑叶的质量控制。单点校正在一定条件下比斜率校正和多点校正更具优势。

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