摘要
[目的]基于试验设计对高粱素生物合成关键酶-烷基间苯二酚合酶(SbARS)的异源双控表达进行多目标优化。[方法]在前期成功进行SbARS的温控自裂解异源表达的基础上,依次通过PB设计、最陡爬坡设计、响应面设计及线性加权多目标优化等方法,分析了11个与SbARS在大肠杆菌中双控异源表达密切相关因素的影响。[结果]菌体培养时长、IPTG诱导时长和甘氨酸浓度对SbARS酶活力和裂解率影响显著;当菌体培养时长为6.8h、IPTG诱导时长为4.6 h和甘氨酸质量浓度为1.0 g/L时,可获得总体最优SbARS酶活力(117.12±0.13)%和裂解率(89.21±0.35)%。[结论]研究结果为新型除草剂高粱素的生物合成研究奠定理论基础。
-
单位生物工程学院; 浙江工业大学; 浙江省桐庐汇丰生物科技有限公司