基因组DNA的提取与纯化

作者：陈桂信; 吕柳新; 赖钟雄; 潘东明

来源：江西农业大学学报, 2004, (03): 329-333.

DOI：10.13836/j.jjau.2004074

• 
• 基因组DNA
• 提取
• 纯化

以嫩芽为材料,对Dellaporta等用CTAB制备植物基因组DNA的方法进行改良,结果表明,加入质量分数ω=10%PVPP与材料充分研磨,将提取缓冲液的β-巯基乙醇体积分数降低为1%,能有效地去除材料中的多酚类物质;用氯仿/异戊醇(24∶1)抽提裂解液2次所获得的上相,加入1/10体积的65℃的NaCl/CTAB溶液混匀,再用氯仿/异戊醇(24∶1)连续抽提2次,并在DNA粗提液中加入适量高浓度NaCl和无水乙醇沉淀DNA,可以有效地去除多糖的干扰,获得比较纯净的DNA样品;PCR特异性扩增的结果表明,以改良法的DNA为模板可获得PPO基因保守区约600～800bp特异条带,且扩增条带较亮、无引物二聚体出现。

• 单位
  福建农林大学