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摘要
为了验证油菜溶血磷脂酸酰基转移酶4(BnaLPAT4)在油脂合成中的作用，本试验通过同源克隆法从甘蓝型油菜湘油15号中获得2条全长分别为1 143、1 140 bp的BnaLPAT4基因，分别命名为BnaLPAT4-1和BnaLPAT4-2,构建pGAL::BnaLPAT4-1和pGAL::BnaLPAT4-2载体转化酵母INVSC,通过气相色谱法检测酵母中的脂肪酸组分，并以植物表达载体pBI121为骨架，构建pNapin::BnaLPAT4-1和pNapin::BnaLPAT4-2载体并通过农杆菌介导法转染拟南芥，获得转基因苗后检测拟南芥转基因种子脂肪酸组分。结果表明，酵母菌转化子与空转化子之间的脂肪酸组分发生显著变化，其中BnaLPAT4-1转化子饱和脂肪酸的含量达66.88%,是空转化子的2.61倍，酵母转化子生成了亚麻酸和花生酸；BnaLPAT4-2转化子中C16脂肪酸的含量较对照提高22.40个百分点。BnaLPAT4在拟南芥种子中特异表达，花生烯酸含量较野生哥伦比亚型提高4.7个百分点，且拟南芥转基因材料种子中的芥酸和花生三烯酸的含量为0。本研究结果为验证BnaLPAT4基因的生物学功能和油脂成分改良提供了理论参考。
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