摘要
黑曲霉在食品工业中广泛应用,但近年来发现该菌群可产生赭曲霉毒素A(OTA)等强致癌真菌毒素,对食品安全造成严重威胁。为了研究黑曲霉中OTA合成调控机理,构建了乳清酸核苷-5′-磷酸脱羧酶基因pyrG缺失菌株及回补菌株,利用HPLC-FLD检测该基因对OTA生物合成的影响,通过添加不同浓度尿嘧啶核苷及荧光定量PCR,初步探索该基因调控OTA合成的机理,并检测玉米粒上该基因缺失菌株中OTA含量的变化。结果表明:与野生型菌株及回补菌株相比,pyrG基因缺失菌株OTA含量分别降低77.8%和75.7%;该基因调控OTA合成不依赖尿嘧啶核苷的浓度;与野生型菌株相比,pyrG基因缺失菌株OTA合成基因簇中基因pks、p450、nrps、hal和bZIP基因的表达水平分别下调52.0%、36.0%、84.0%、46.0%、74.0%,与回补菌株相比,分别下调55.7%、42.1%、85.1%、50.3%、76.0%;pyrG基因缺失后导致玉米粒上的黑曲霉菌株几乎不产生OTA。pyrG基因缺失影响黑曲霉中OTA合成基因pks、p450、nrps、hal及bZIP的表达,从而降低了OTA的合成水平。
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单位生物工程学院; 河南工业大学