宗地花猪LOX基因CDS区克隆、真核表达载体构建及生物信息学分析

作者：王鑫; 徐龙鑫; 莫本田; 武俊达; 周文章; 张凯凯; 李干洲; 周迪; 杨蓉

来源：中国畜牧杂志, 2023, 59(12): 265-271.

DOI：10.19556/j.0258-7033.20221030-04

• 宗地花猪
• LOX基因
• 克隆
• 载体构建
• 生物信息学

本研究旨在对宗地花猪LOX(Lysyl Oxidase)基因编码区（Coding Sequence,CDS）区进行克隆和分析，构建其真核表达载体，并对该基因进行生物信息学分析。实验采用RT-PCR克隆方法，以GenBank中公布的猪LOX基因序列为模板，克隆宗地花猪背最长肌组织LOX基因CDS区序列，测序鉴定后进行生物信息学分析，同时构建该基因真核表达载体pEGFP-C1-LOX。结果表明：克隆得到LOX基因CDS区全长1 260 bp，编码419个氨基酸，编码蛋白的分子量为47009.34Da，有45个磷酸化位点，为无跨膜区域的疏水性蛋白，其核苷酸序列与牛、鸡、黑猩猩、狗、驴、羊、马及人的相似性分别为90.9%、74.6%、89.2%、91%、91.3%、90.8%、84.4%和44.5%，不同物种间相似性较高，进化过程中具有高度保守性，与牛、羊、驴、狗亲缘关系较近，LOX蛋白主要定位在细胞核。本研究首次克隆出宗地花猪LOX基因CDS区全长序列，并成功构建LOX基因真核表达载体pEGFP-C1-LOX，为进一步探索宗地花猪LOX基因功能及作用机制提供了理论基础。

• 单位
  贵州省农业科学院