摘要
目的通过构建重组腺病毒载体,转染骨关节炎软骨细胞,探讨线粒体转录因子A(TFAM)保护软骨细胞退变的作用。方法构建TFAM重组腺病毒载体,并转染骨关节炎软骨细胞。分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹法检测转染后细胞中TFAM mRNA及蛋白的表达情况;鉴定转染后软骨细胞线粒体DNA拷贝数的变化。结果成功构建TFAM重组腺病毒,且体外转染率高;RT-PCR结果示细胞转染后MOI为500、1 000组TFAM mRNA的表达明显升高(P<0.01);Western印迹结果示转染后MOI为500、1 000两组TFAM蛋白表达均升高,其中MOI=1 000组表现最为明显(...
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