沉默circAMOTL1对结直肠癌Caco-2细胞生物学行为影响的体外实验研究

作者：于曦; 王楠; 金飞; 支宇^*

来源：联勤军事医学, 2023, 37(02): 89-95.

DOI：10.13730/j.issn.2097-2148.2023.02.001

• 结直肠癌
• circAMOTL1
• miR-296-5p
• 迁移
• 侵袭
• 凋亡

目的 探讨沉默circAMOTL1对结直肠癌细胞生物学行为的影响及其可能机制。方法 实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测结直肠癌组织与癌旁组织中circAMOTL1、miR-296-5p的表达量。Pearson相关分析探讨结直肠癌组织中circAMOTL1、miR-296-5p表达量的相关性。体外培养人结直肠癌细胞Caco-2,sh-NC、sh-circAMOTL1、miR-NC、miR-296-5p mimic分别转染至Caco-2细胞(sh-NC组、sh-circAMOTL1组、miR-NC组、miR-296-5p mimic组),sh-circAMOTL1与miR-296-5p inhibor共转染至Caco-2细胞(sh-circAMOTL1+miR-296-5p inhibor组)。流式细胞术、Transwell实验、Western blot法分别检测细胞凋亡、迁移及侵袭、Cleaved-caspase 3蛋白表达。双荧光素酶报告实验检测circAMOTL1和miR-296-5p靶向调控作用。结果 结直肠癌组织中circAMOTL1表达量高于癌旁组织(2.79±0.30 vs. 0.89±0.15,P<0.05),miR-296-5p表达量低于癌旁组织(0.42±0.09 vs. 1.12±0.14,P<0.05)。circAMOTL1与miR-296-5p呈负相关(r=-0.8125,P<0.0001)。转染sh-circAMOTL1或miR-296-5p mimic后，迁移及侵袭细胞数减少(P均<0.05),细胞凋亡率、Cleaved-caspase 3蛋白水平升高(P均<0.05)。circAMOTL1可靶向调控miR-296-5p的表达。共转染sh-circAMOTL1和miR-296-5p inhibor后，迁移及侵袭细胞数增多(P均<0.05),细胞凋亡率、Cleaved-caspase 3蛋白水平降低(P均<0.05)。结论 沉默circAMOTL1可通过靶向调控miR-296-5p表达而抑制结直肠癌细胞迁移、侵袭及诱导细胞凋亡。

• 单位
  大连大学附属新华医院