慢病毒介导hsa-miR-199a-5p通过转化生长因子-β/Smad通路抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞纤维化的研究

作者：史玉仓; 周志红; 刘艳芳; 吴泽勇; 黄海华; 吴志远^*

来源：中华整形外科杂志, 2022, 38(05): 570-577.

• 瘢痕疙瘩
• 成纤维细胞
• 微RNAs
• hsa-miR-199a-5p
• 胶原
• 纤维化

目的探讨hsa-miR-199a-5p对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)纤维化过程的影响及其与转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路的关系。方法将携带hsa-miR-199a-5p基因的慢病毒载体(hsa-miR-199a-5p组)及空白慢病毒载体(rLv-NC组)感染KFs, 并设空白对照组(KFs正常培养)。采用CCK-8法检测各组KFs的增殖情况。慢病毒感染KFs 48 h后, 应用实时定量PCR(qRT-PCR)检测各组KFs的hsa-miR-199a-5p表达水平, 流式细胞仪检测细胞凋亡情况, Transwell实验检测细胞侵袭能力, 并分别采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad3及TGF-β1的mRNA和蛋白表达水平。结果病毒感染KFs 48 h后, hsa-miR-199a-5p组的hsa-miR-199a-5p表达量明显高于rLv-NC组和空白对照组, 差异有统计学意义(P<0.01);与rLv-NC组和空白对照组相比, hsa-miR-199a-5p组的细胞增殖率、侵袭性均有所降低, 细胞凋亡率有所升高, 差异有统计学意义(P<0.01);hsa-miR-199a-5p组的Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA、Smad3、TGF-β1的mRNA及蛋白表达水平均明显低于rLv-NC组和空白对照组, 差异有统计学意义(P<0.01)。结论 hsa-miR-199a-5p可能通过抑制TGF-β/Smad通路的表达, 抑制KFs增殖与侵袭, 并促进KFs凋亡, 从而抑制瘢痕疙瘩纤维化。

• 单位
  广东医科大学附属医院; 柳州市工人医院