截短型马尔堡病毒包膜糖蛋白的原核表达纯化及鉴定

作者：闻雁波; 吴诗坡; 侯利华; 陈薇

来源：生物技术通讯, 2018, 29(01): 13-16.

• 马尔堡病毒
• 包膜糖蛋白
• 原核表达

目的:制备重组可溶性截短型马尔堡病毒包膜糖蛋白(MAGP),并验证其抗原性。方法:PCR扩增MAGP截短片段MAGP40-289、MAGP148-526、MAGP240-526和MAGP258-526,克隆至原核表达载体pET-32a并转化至大肠杆菌进行诱导表达,经亲和层析、阴离子交换层析获得纯度良好的可溶性截短蛋白抗原,利用ELISA试验对该蛋白的抗原性进行验证。结果:截短抗原MAGP240-526在大肠杆菌中可溶性表达良好,表达量约17 mg/L;Western印迹显示该抗原能与Ad5-MAGPopt免疫后的小鼠血清发生特异反应。结论:经原核系统表达的截短型MAGP具有良好的抗原性,可用于检测相关疫苗激发的抗MAGP抗体水平或评价抗MAGP的结合活性。