黄柏碱对LPS诱导小胶质细胞活化的抑制作用及其机制研究

作者：许孟秋; 陆韵薇; 易慧敏; 于顾然^*

来源：中医药导报, 2021, 27(07): 10-15.

DOI：10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2021.07.001

• 小胶质细胞
• 黄柏碱
• 脂多糖
• 神经炎症
• TLR-4/MYD-88/NF-κB

目的:探讨黄柏碱对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞活化的抑制作用及其机制。方法:采用脂多糖(1μg/mL)处理BV2小胶质细胞建立体外小胶质细胞活化模型,将细胞分别设为对照组,模型组,抑制剂组(resatorvid,TLR-4抑制剂)和黄柏碱低、中、高剂量组,使用噻唑蓝(MTT)比色法检测黄柏碱对LPS处理后BV2小胶质细胞活性的影响;倒置相差显微镜下观察各组细胞形态变化;Griess法测定黄柏碱处理前后对NO水平影响;Western blotting法检测炎症蛋白iNOS、COX-2、TNF-α表达,以及通路蛋白TLR-4/MYD-88/NF-κB(p65)的表达情况。免疫荧光法检测黄柏碱对LPS(1μg/mL)诱导BV2小胶质细胞活化后iNOS、NF-κB(p65)的荧光值及核定位情况。结果:MTT结果显示不同浓度黄柏碱,不同浓度LPS,不同浓度黄柏碱+LPS,以及抑制剂+LPS对BV2小胶质细胞活性无明显影响;与对照组比较,LPS处理后小胶质细胞胞体变大,突起变短、形态呈"阿米巴状",NO释放量增加,黄柏碱处理后改善;与LPS模型组比较,100、200、300μmol/L黄柏碱均能不同程度降低iNOS、COX-2、TNF-α、TLR-4、MYD-88、NF-κB(p65)蛋白表达水平,并能抑制NF-κB的核转移及iNOS在胞浆内的表达。结论:黄柏碱对LPS刺激所致的BV2小胶质细胞炎症反应有保护作用,其机制可能与抑制TLR-4/MYD-88/NF-κB(p65)通路激活及炎症因子释放有关。

• 单位
  南京中医药大学