切向流过滤结合超速离心分离小细胞外囊泡方法的建立

作者:王灵; 李梦诗; 徐莎; 陈国栋; 王越*
来源:中国生物制品学杂志, 2022, 35(09): 1096-1101.
DOI:10.13200/j.cnki.cjb.003713

摘要

目的 建立切向流过滤结合超速离心分离小细胞外囊泡的方法,以期提升小细胞外囊泡的分离效率。方法使用切向流过滤结合超速离心的方法分离小细胞外囊泡,并通过透射电镜观察、纳米颗粒追踪、Western blot等技术对分离的囊泡进行鉴定。结果 通过该方法分离的小细胞外囊泡直径主要分布在30~250 nm之间,透射电镜下可明确观察到囊泡样结构,纯化后的细胞外囊泡CD9、CD63和ALIX蛋白呈阳性表达,分离时间较常规超速离心方法明显缩短。结论 切向流过滤结合超速离心能够有效分离小细胞外囊泡,提升分离效率。

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