微小RNA-155在结肠炎相关结肠癌发生过程中的表达变化

作者：李伟伟; 韩文晓; 赵新华; 汪红英

来源：中华肿瘤杂志, 2014, 36(04): 257-262.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2014.04.004

• 微RNAs
• 结肠炎
• 结肠肿瘤
• 氧化偶氮甲烷
• 葡聚糖硫酸钠
• 小鼠

目的探究微小RNA-155(miR-155)在结肠炎相关结肠癌发生过程中的作用并初步筛选其下游的靶基因。方法联合应用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导C57BL/6小鼠发生结肠炎相关结肠癌,得到从结肠炎到结肠癌的3个不同阶段的小鼠模型(分别命名为AD1、AD2和AD3),同时设立无任何处理的对照组和只给予DSS来模拟慢性炎症的DSS组,取各组小鼠的结肠组织提取总RNA,逆转录成cDNA后应用实时荧光定量PCR检测miR-155的表达。结合前期的全基因组表达谱芯片数据和miRNA靶基因预测软件TargetScan和PicTar预测出来的潜在靶基因,初步筛选miR-155的下游靶基因,并用PCR进一步验证潜在靶基因的表达变化。结果 ADM和DSS联合使用能有效地模拟人类结肠炎相关结肠癌,结肠炎相关结肠癌的演变顺序为正常、轻度不典型增生、中度不典型增生、重度不典型增生和腺癌。DSS组小鼠结肠miR-155的表达水平(0.005 6±0.003 7)与对照组(0.012 0±0.005 1)比较,差异无统计学意义(p>0.05),而AD3组小鼠的miR-155表达水平(0.054 4±0.027 0)高于DSS组(0.005 6±0.003 7),差异有统计学意义(p<0.01)。结合全基因组表达谱芯片和miRNA靶基因预测软件,初步筛选出miR-155可能的下游靶基因为Tle4、Kcna1、Itk、Bcorl1、Cacna1c、Rspo2和Foxo3,其中Kcna1和Cacna1c经PCR验证与芯片检测结果一致。结论 miR-155的表达升高与结肠炎相关结肠癌有关,而与慢性炎症无关。

• 单位
  分子肿瘤学国家重点实验室; 中国医学科学院肿瘤医院; 北京协和医学院