温阳振衰颗粒对TGF-β1诱导肾小管上皮细胞转分化状态下ERK/STAT3信号转导通路的影响

作者：林湘东; 向茗; 陈新宇^*

来源：湖南中医药大学学报, 2022, 42(09): 1419-1425.

• 温阳振衰颗粒
• 转化生长因子-β1
• 肾小管
• 上皮细胞转分化
• ERK/STAT3
• 机制研究

目的 探讨温阳振衰颗粒对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞转分化状态下细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase, ERK）/信号转导及转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3, STAT3)信号转导通路的影响。方法 体外培养人肾小管上皮(HK-2)细胞，将HK-2细胞分为空白对照组、TGF-β1组（10 ng/mL TGF-β1）、TGF-β1+空白血清组（10 ng/mL TGF-β1）、TGF-β1+温阳振衰颗粒组（10 ng/mL TGF-β1+10%含药血清）、TGF-β1+U0126组（MEK1/2抑制剂，母液1∶10 000）、TGF-β1+厄贝沙坦组（10 ng/mL TGF-β1+10%含药血清），处理时间为24 h。倒置显微镜下观察细胞的形态改变，采用Western blot法和RT-qPCR法检测钙黏附蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白（Vimentin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白和mRNA的表达。结果与空白对照组比较，TGF-β1组和TGF-β1+空白血清组细胞形态发生明显改变，呈长梭形或形态多样无规则，细胞排列稀疏，类似成纤维细胞形态，生长缓慢，贴壁差，多见漂浮细胞；与TGF-β1组和TGF-β1+空白血清组比较，TGF-β1+温阳振衰颗粒组、TGF-β1+U0126组、TGF-β1+厄贝沙坦组形态显著改善，大部分仍保持鹅卵石样，贴壁尚可，漂浮细胞明显减少。与空白对照组比较，TGF-β1组和TGF-β1+空白血清组E-cadherin蛋白和mRNA表达下调，Vimentin、α-SMA蛋白和mRNA表达上调，p-ERK1/2、p-STAT3蛋白表达上调（P<0.05）；与TGF-β1组和TGF-β1+空白血清组比较，TGF-β1+温阳振衰颗粒组、TGF-β1+U0126组和TGF-β1+厄贝沙坦组E-cadherin蛋白和mRNA表达上调，Vimentin、α-SMA蛋白和mRNA表达下调，p-ERK1/2、p-STAT3蛋白表达下调（P<0.05）,且3组效果相当；实验所有组别中ERK1/2、STAT3蛋白和mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 温阳振衰颗粒可能通过下调ERK1/2和STAT3蛋白的磷酸化，从而部分阻断ERK/STAT3信号转导通路的激活，对肾小管上皮细胞转分化起到延缓作用。

• 单位
  湖南中医药大学; 湖南中医药大学第一附属医院