摘要
目的 探讨Smad泛素化调节因子2 (Smurf2)在转化生长因子-β1 (TGF-β1)诱导后对人胚胎眼巩膜成纤维细胞(HFSFs)分泌Smads蛋白、Ⅰ型胶原α1 (COLIA1)的影响,探讨泛素化在巩膜重塑中的作用。方法 HFSFs复苏并稳定传代后,免疫组化(IHC)法检测细胞中Smurf2的表达。将HFSFs细胞分别设空白对照组、TGF-β1组(加入10ng/mL TGF-β1)、Control siRNA转染组(10ng/mL TGF-β1+Control siRNA)及Smurf2siRNA转染组(10ng/mL TGF-β1+Smurf2siRNA)。Western blot法检测COLIA1蛋白表达水平。RT-PCR法检测各组细胞中Smurf2、Smad2、Smad3和Smad7的mRNA表达水平。结果 IHC结果显示,HFSFs中有Smurf2蛋白表达。TGF-β1诱导HFSFs中COLIA1蛋白显著性高表达,而当Smurf2被抑制时,COLIA1蛋白表达受抑制。与空白对照组比较,Smad7mRNA表达水平呈上升趋势,差异有统计意义(P<0.05),但Smad7蛋白表达水平与PCR结果不完全相同;各培养组中Smad2和Smad3mRNA和蛋白表达水平,与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Smurf2表达于HFSFs细胞中,且随着Smurf2表达减少,HFSFs细胞中Smad7蛋白含量呈上升趋势,COLIA1含量呈下降趋势。提示Smurf2可能通过作用于TGF-β1/Smads信号通路参与了巩膜重塑过程。
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单位泉州市妇幼保健院; 漳州卫生职业学院; 福建医科大学附属第二医院