N-糖酰胺酶F在大肠杆菌中的高效表达及其脱糖基化作用研究

作者：苏移山; 王圣钧; 王鹏; 祁庆生

来源：生物工程学报, 2005, (6): 911-915.

DOI：10.3321/j.issn:1000-3061.2005.06.010

• N-糖酰胺酶F
• PET28a
• RNase B
• 脱糖基化

从脑膜炎脓杆菌(Flavobacterium meningosepticum)基因组中通过PCR扩增了N-糖酰胺酶F(PNGase F)基因,经酶切后与表达载体pET28a连接,获得的重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3).重组大肠杆菌经诱导表达和纯化提取后,获取大量高纯度N-糖酰胺酶F,其纯度达90%以上.试验证明,经纯化的重组N-糖酰胺酶F可以切除核糖核酸酶B、转铁蛋白和人IgG等糖蛋白上的

• 单位
  微生物技术国家重点实验室; 山东大学