昆明小鼠胚胎干细胞滋养层制备条件的实验研究

作者：黄林; 莫曾南; 覃敏

来源：现代生物医学进展, 2010, (01): 62-65.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2010.01.006

• 胚胎成纤维细胞
• 胚胎干细胞
• 滋养层 Embryonic fibroblasts
• Embryonic stem cell
• Feeder layer

目的:建立小鼠胚胎成纤维细胞(MEFS)滋养层,用于昆明小鼠胚胎干细胞的培养。方法:取妊娠13.5的胎鼠,采用组织消化法分离培养出原代成纤维细胞,对MEFs的生长形态、生长曲线及分裂指数进行观察;MTT法筛选丝裂霉素C(MMC)作用的最佳浓度和时间;取妊娠3.5d的囊胚在经MMC处理的饲养层上培养,观察胚胎干细胞集落生成情况。结果:MEFS为一种贴壁生长且增殖速度较快的细胞,第三代细胞增殖旺盛,第5代以后细胞开始变形并趋于衰老;MMC能抑制胚胎成纤维细胞的增殖,最佳的作用浓度和时间是10ug/ml作用2.5～4h,20ug/ml作用1-2.5h。妊娠3.5d小鼠囊胚在饲养层上培养能形成典型的"...

• 单位
  广西医科大学第一附属医院; 广西医科大学