针对干扰素-γ的新型核酸适配体的筛选及鉴定

作者：曹蓓蓓; 胡燕; 段金虹; 许丹科; 王琛; 杨先达

来源：基础医学与临床, 2013, (06): 661-665.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2013.06.006

• 适配体
• SELEX
• IFN-γ aptamer
• IFN-γ

目的研发能特异性结合干扰素-γ(IFN-γ)的DNA适配体,为发展IFN-γ的新型检测技术提供基础。方法体外合成全长为59个碱基并含有21个随机寡核苷酸的单链DNA文库,以IFN-γ蛋白为靶标,利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX),从单链DNA文库中筛选能够选择性结合IFN-γ蛋白的核酸适配体;流式细胞术检测富集进度、适配体与IFN-γ蛋白结合特性;MFold软件预测二级结构。结果经多轮筛选获得了能够识别IFN-γ蛋白的DNA适配体B3-8,其能够选择性地结合IFN-γ蛋白,而与血清白蛋白的结合较弱。经检测其Kd值为185 nmol/L。结论 DNA适配体B3-8能选择性地识别IFN-...

• 单位
  国家纳米科学中心; 南京大学; 中国医学科学院基础医学研究所; 化学化工学院; 生命分析化学国家重点实验室