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摘要
以琼脂糖凝胶Sepharose 4 FF为介质,分别经CNBr和NHS活化后偶联多粘菌素B(Polymyxin B,PMB)为配基,制备两种不同间隔臂的亲和层析柱;选择偶联配基载量较高的亲和柱Sepharose 4 FF-CN-PMB,分析亲和层析温度、流速、pH值及盐离子浓度等参数对亲和层析效果的影响,优化小牛血清亲和层析去除内毒素工艺;通过细胞增殖实验研究内毒素去除工艺对小牛血清促细胞生长活性的影响。结果表明:制备了具有高PMB配基载量的亲和层析柱,利用该亲和层析柱建立了去除新生小牛血清内毒素的最优工艺;经该工艺处理后,小牛血清中内毒素含量大大降低,同时并未对其细胞增殖活性产生显著影响。本研究将为进一步降低小牛血清成本,提高小牛血清质量,推动生物制品开发奠定基础。
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单位山西省生物研究所
