Sulfolobus tokodaii strain 7高温酸性α-淀粉酶基因在大肠杆菌中克隆表达及其酶学性质

作者：魏涛; 孙浩; 申玉龙; 毛多斌

来源：食品与发酵工业, 2013, (05): 13-17.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2013.05.001

• 高温酸性α-淀粉酶
• 克隆
• 表达
• 酶学性质 thermophilic and acidic α-amylase
• cloning
• expression
• enzymatic properties

以超嗜热古菌Sulfolobus tokodaii strain 7基因组DNA为模板,通过PCR扩增高温酸性α-淀粉酶基因ST0817,将此基因克隆至表达载体pET15b,并转化大肠杆菌Escherichia coli BL21-CodenPlus(DE3)-RIL,获得重组大肠杆菌工程菌。通过热处理、镍柱亲和层析和分子筛层析,得到纯化重组酶,SDS-PAGE分析表明,该酶分子量为53.0 kDa。酶学性质研究表明,该酶最适温度和pH分别为75℃和5.5;具有较强的热稳定性和pH稳定性,在85℃处理8 h保持50%左右活力,在pH 5.2处理120 min仍保持50%活力。此酶对不同底物水解...

• 单位
  微生物技术国家重点实验室; 山东大学; 食品与生物工程学院; 郑州轻工业学院