云南省芒市采集蠓中辛德毕斯病毒的分离与鉴定

作者：何于雯; 李楠; 孟锦昕; 王静林^*

来源：中国媒介生物学及控制杂志, 2021, 32(04): 498-502.

• 辛德毕斯病毒
• 蠓
• 分离
• 鉴定
• 系统进化分析

目的了解云南省德宏傣族景颇族自治州(德宏州)芒市蠓携带虫媒病毒情况,为虫媒病毒的研究和防控提供科学依据。方法 2013年7月在德宏州芒市郊区牛和羊的养殖场中采用灯诱方法收集蠓标本。对采集到的蠓进行研磨离心,上清分别接种金黄地鼠肾细胞(BHK-21)和白纹伊蚊细胞(C6/36)进行病毒分离。阳性分离物分别采用甲病毒属、黄病毒属和布尼亚病毒属特异引物进行初步鉴定;采用辛德毕斯病毒(SINV)NS1基因特异性引物对阳性分离物进行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增并进行测序及序列分析。结果共采集到4 500余只蠓,分44批进行病毒分离,获得1株阳性分离物(编号:YN222)接种在BHK-21细胞24 h后迅速产生明显细胞病变,接种在C6/36细胞72 h后产生明显的细胞病变。甲病毒属引物RT-PCR扩增阳性,而黄病毒属和布尼亚病毒属引物扩增均为阴性。甲病毒属引物扩增阳性产物测序后BLAST结果显示YN222株分离物与MRE16株SINV核苷酸同源性最高为93.7%。采用MRE16株NS1基因特异性引物进行RT-PCR扩增结果为阳性,测序获得1 605 nt序列。系统进化分析结果显示,蠓新分离病毒YN222与澳大利亚东方型SINV位于同一进化分支内,核苷酸和氨基酸同源性较高,核苷酸在93.7%～99.6%,氨基酸为99.4%。结论在云南省德宏州采集蠓中分离的病毒YN222为澳大利亚东方型SINV,这是首次在蠓中分离到SINV。

• 单位
  云南省畜牧兽医科学院