siRNA干扰Geminin基因对脑胶质瘤放疗敏感性的影响

作者：贺维; 潘鹭翔; 韩宇晨; 邹彦琦; 顾**; 贾博; 刘骁; 曹正聪; 姜雨然; 张阔; 张旺倩; 王舒宁; 李萌; 张英起; 郝强^*

来源：山西医科大学学报, 2023, 54(01): 17-23.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2023.01.003

• 脑胶质瘤
• Geminin
• siRNA
• DNA复制
• 细胞周期
• 细胞凋亡
• Cdt1
• 放疗敏感性

目的 观察敲低Geminin对人脑胶质瘤细胞放疗敏感性的影响。方法 利用GEPIA和CGGA数据库分析Geminin在脑胶质瘤组织中的表达及与生存期的相关性。实验分为两组：si-GL2组(对照组)和si-Gem组(干扰组),设计siRNA干扰序列(si-Gem)和阴性对照序列(si-GL2),分别转染脑胶质瘤细胞LN229和U87,qRT-PCR和Western blot检测转染效率及蛋白表达水平。流式细胞术检测碘化丙啶(PI)染色后DNA含量分布，进而分析敲低Geminin对DNA再复制的影响。通过AnnexinⅤ-FITC/PI法，用流式细胞术检测敲低Geminin对细胞凋亡的影响。CCK-8细胞增殖实验检测敲低Geminin对胶质瘤细胞LN229和U87放疗敏感性的影响。Western blot检测Geminin相关分子Cdt1和DNA相关损伤蛋白γ-H2AX的表达水平。结果 脑胶质瘤组织中Geminin的表达水平高于癌旁正常组织，且Geminin表达越高，脑胶质瘤患者预后越差(P<0.05)。与si-GL2组相比，si-Gem组Geminin在LN229和U87细胞中的表达降低(P<0.05)。与si-GL2组相比，si-Gem组敲低Geminin可诱导脑胶质瘤细胞出现DNA再复制表型、细胞凋亡比例显著增加(P<0.05),脑胶质瘤细胞对放疗敏感性增强(P<0.05)。与si-GL2组相比，si-Gem组Geminin相关分子Cdt1蛋白表达水平降低，γ-H2AX的蛋白表达水平升高。结论 敲低Geminin可以诱导脑胶质瘤细胞出现DNA再复制表型，造成DNA复制压力，并引起自发性细胞周期阻滞及细胞凋亡增多，进而增强脑胶质瘤细胞放疗敏感性，Geminin有望成为脑胶质瘤治疗的新靶点。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 生命科学学院; 基础医学院; 西北大学