摘要
目的观察晚期氧化蛋白产物(AOPPs)能否诱导小胶质细胞M1型激活。方法小鼠血清白蛋白(MSA)与次氯酸钠溶液反应制成AOPPs。噻唑蓝(MTT)法检测经不同浓度AOPPs处理24 h后BV2细胞的活力,以选择AOPPs的工作浓度。根据浓度效应对BV2细胞进行分组处理,二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)法和激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot技术检测细胞内还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶4(NOX4)、中性粒细胞黏附分子(CD11b)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果 40μg/ml和800μg/ml AOPPs作用后BV2细胞活力较其他浓度明显降低[(50.052±2.163)%、(36.505±1. 589)%,P=0.000]。与对照组比较,随AOPPs作用时间的延长和浓度的增加,BV2细胞胞内ROS产生增多,NOX4、CD11b和TNF-α蛋白表达量均增加(ROS:P=0.000; NOX4:PLPS=0.001,P50μg/ml=0.000,P100μg/ml=0. 004,P200μg/ml=0.000;CD11b:P=0. 000;TNF-α:P=0. 000)。结论 AOPPs可以通过激活BV2细胞生成ROS产生M1型激活。
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