双氢青蒿素单独和联合甲氨蝶呤在皮肤T细胞淋巴瘤细胞系的抗肿瘤作用

作者：张芊; 王艺萌; 姜蔚蔚; 谷晓广; 张春雷

来源：中国中西医结合皮肤性病学杂志, 2018, 17(02): 112-117.

DOI：10.3969/j.issn.1672-0709.2018.02.005

• 皮肤T细胞淋巴瘤
• 双氢青蒿素
• 甲氨蝶呤
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的研究双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)单独和联合甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)对皮肤T细胞淋巴瘤(Cutaneous T cell lymphoma,CTCL)细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,并探讨其分子机制。方法分别采用不同浓度DHA,5.0μmol/L MTX,5.0μmol/L DHA联合5.0μmol/L MTX处理CTCL细胞系HH细胞24、48或72 h后,采用MTS法检测HH细胞的生存率。用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。用Western印迹法检测处理HH细胞48 h后凋亡相关基因和DNA损伤相关基因的蛋白表达。统计分析采用SPSS 21.0软件,双侧P<0.05为差异有统计学意义。结果 DHA能明显抑制HH细胞的增殖,并且有时间依赖性和剂量依赖性,5.0μmol/L DHA联合5.0μmol/L MTX对细胞增殖的抑制作用明显强于5.0μmol/L MTX以及5.0μmol/L DHA(P<0.05)。流式细胞仪结果显示,随着DHA浓度增加,作用时间延长,HH细胞凋亡比例不断增加,联合组的凋亡细胞比例均显著高于5.0μmol/L DHA组和5.0μmol/L MTX组(P<0.05)。此外,各浓度DHA组、5.0μmol/L MTX组、联合组的G0/G1期细胞比例明显高于溶剂对照组,而其G2/M期细胞比例均明显降低(P<0.05)。Western印迹结果显示,联合组与DHA组、MTX组、对照组比较,凋亡相关基因p53、Noxa、Bax、caspase 3和DNA损伤相关基因γ-H2AX、ATM蛋白的表达明显增加。结论 DHA通过抑制细胞增殖和促进细胞凋亡来抑制CTCL细胞系生长,联合MTX能明显提高抑制CTCL细胞的生长率。

• 单位
  北京大学第三医院