一种从新鲜脑胶质瘤标本中分离小胶质细胞的改良方法

作者：叶红星; 岳琪; 莫链杰; 张新; 姚瑜; 毛颖; 周良辅

来源：中华神经外科杂志, 2013, 29(9): 945-950.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-2346.2013.09.025

• 人小胶质细胞
• 脑胶质瘤
• 快速分离

目的 建立一种快速有效从脑胶质瘤组织中分离小胶质细胞的改良方法.方法 采用密度梯度离心法联合磁珠分选法从脑胶质瘤组织中分离小胶质细胞.用流式细胞术、Western blot 和细胞免疫荧光检测细胞纯度,流式检测免疫表型,趋化及吞噬实验检测其生物学功能;对从不同级别胶质瘤组织分离的小胶质细胞产量进行定量分析.结果 收获细胞具有小胶质细胞典型形态及Iba1染色阳性,纯度可达(95.1±4.2)％;流式细胞术检测显示其表达CD11b、HLA-DR等,并对ATP 的趋化作用呈浓度依赖性,且在体外具有良好的吞噬乳胶微球(latex beads)的功能.此外,每克胶质瘤组织分离小胶质细胞细胞产量:低级别组(n=4),(4.0±0.5) ×105;高级别组(n=8),(4.3±0.4) ×105,两组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 利用改良的分离小胶质细胞方法能从新鲜脑胶质瘤组织中快速获得大量高纯度小胶质细胞.

• 单位
  浙江大学医学院附属第一医院; 浙江大学; 复旦大学附属华山医院