TFEB介导的溶酶体功能障碍在ZEA致TM3细胞凋亡中的作用

作者：杨黛祺; 侯凡蓉; 郑豪; 邹辉; 顾建红; 袁燕; 刘学忠; 刘宗平; 卞建春^*

来源：中国兽医科学, 2023, 53(07): 932-938.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0112

• 玉米赤霉烯酮(ZEA)
• 小鼠睾丸间质细胞(TM3)
• 转录因子EB
• 凋亡
• 溶酶体
• 线粒体

为揭示玉米赤霉烯酮（ZEA）的雄性生殖毒性机理，对转录因子EB(TFEB)介导的溶酶体功能障碍在ZEA致TM3细胞凋亡中的作用进行了研究，试验以小鼠睾丸间质细胞株（TM3细胞）为材料，用0（对照组）、5、10μmol/L ZEA分别处理细胞24 h，流式细胞术检测TM3细胞内Lysotracker水平；Western-blot检测凋亡相关蛋白CC3、CC9、Bax、Bcl2，溶酶体相关膜蛋白LAMP1、LAMP2，组织蛋白酶B(CTSB)、D(CTSD)以及细胞质内TFEB蛋白等的表达水平。过表达TFEB,Western-blot检测CC3、CC9、Bax、Bcl2表达水平。结果显示，与对照组相比，ZEA处理组Bax、CC3、CC9表达水平显著上升而Bcl2表达水平显著下降（P<0.05）；流式细胞术检测结果显示溶酶体膜稳定性下降；CTSD和CTSB表达水平显著升高（P<0.05）,LAMP2和TFEB表达水平显著降低（P<0.05）,LAMP1表达水平在ZEA为5μmol/L时显著降低（P<0.05）。与ZEA组相比，TFEB过表达后ZEA组的Bax、CC3和CC9蛋白表达水平显著下降（P<0.05），而Bcl2表达水平显著上升（P<0.05），过表达TFEB可缓解ZEA引起的凋亡。结果表明，ZEA可引起TM3细胞凋亡增加，其作用机制与破坏TFEB信号通路，导致溶酶体出现功能障碍有关。

• 单位
  江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 扬州大学