CASC19低表达对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及机制

作者：王晓昆; 张伟; 周美娟; 谢琦

来源：山东医药, 2020, 60(16): 38-42.

• 口腔鳞状细胞癌
• 癌症易感候选基因19
• 微小RNA-802
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的探讨癌症易感候选基因19(CASC19)低表达对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法常规培养人口腔角质细胞NOK及OSCC细胞SCC9、HSC3、CAL-27,并用实时荧光定量PCR法确定SCC9细胞作为实验细胞。取对数生长期SCC9细胞并随机分组,用脂质体法将CASC19过表达对照质粒(pcDNA)、CASC19过表达质粒(pcDNA-CASC19)、CASC19抑制表达对照质粒(si-NC)、CASC19抑制表达质粒(siCASC19)、miR-802阴性对照质粒(miR-NC)、miR-802模拟物(miR-802)分别转染至pcDNA组、pcDNA-CASC19组、si-NC组、si-CASC19组、miR-NC组、miR-802组;将si-CASC19与miR-802抑制剂阴性对照质粒(anti-miR-NC)、miR-802抑制剂(anti-miR-802)共转染至si-CASC19+anti-miR-NC组、si-CASC19+anti-miR-802组,用实时荧光定量PCR法检测细胞内miR-802、CASC19表达确认转染效率。用双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA CASC19与miR-802的靶向关系,Western blotting法检测细胞内细胞周蛋白D1(Cyclin D1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 CASC19与miR-802存在结合位点。与pcDNA组比较,pcDNA-CASC19组miR-802相对表达量低(P <0. 05);与si-NC组比较,siCASC19组miR-802相对表达量高。细胞培养48、72 h,与si-NC组比较,si-CASC19组OD值低,细胞凋亡率高,Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达低,p21、Bax蛋白表达高(P均<0. 05)。与si-NC组比较,si-CASC19组培养48、72 h细胞增殖活力低,细胞凋亡率高,Cyclin D1、Bcl-2蛋白相对表达量低,p21、Bax蛋白相对表达量高(P均<0. 05);与siCASC19+anti-miR-NC组比较,si-CASC19+anti-miR-802组培养48、72 h细胞增殖活力高,细胞凋亡率低,Cyclin D1、Bcl-2蛋白相对表达量高,p21、Bax蛋白相对表达量低(P均<0. 05)。结论 CASC19低表达可抑制OSCC细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与靶向调控miR-802表达有关。

• 单位
  廊坊市人民医院