磷酸酶和张力蛋白同源物在睾丸缺血再灌注损伤中对GC-1细胞焦亡的影响及作用机制

作者：宁金卓; 何凯翔; 许立哲; 蒋焜^*

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(06).

• 睾丸缺血再灌注损伤
• 磷酸酶和张力蛋白同源物
• 焦亡

目的探讨磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)在睾丸缺血再灌注损伤(IRI)中对GC-1细胞焦亡的作用及其机制。方法建立睾丸GC-1细胞(美国ATCC细胞库)缺氧复氧模型, 采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同复氧损伤时间点PTEN的表达变化;分别采用免疫荧光实验、蛋白质印迹法(Western blot)检测转染PTEN后对GC-1细胞焦亡相关蛋白NLRP3和Caspase-1表达水平的影响。组间比较采用t检验, 多组间比较采用单因素方差分析。结果对照组及缺氧复氧组(0、6、12、24 h)PTEN的mRNA表达水平分别为(1.00±0.21、3.48±0.35、3.75±0.38、4.25±0.40、4.06±0.37)。与未缺氧GC-1细胞的对照组比较, 随着复氧损伤时间的增加, PTEN表达明显增高, 并在复氧12 h达到峰值(F=43.21, P<0.05)。Western blot结果显示, 缺氧复氧组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.52±0.04、0.41±0.04)高于对照组(0.24±0.03、0.20±0.03, t=9.700, P<0.05;t=7.275, P<0.05)。过表达PTEN组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.75±0.06、0.62±0.05)高于其对照组(0.53±0.04、0.42±0.03)明显(t=5.284, P<0.05;t=5.941, P<0.05)。沉默PTEN组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.36±0.03、0.32±0.03)低于对照组(0.52±0.04、0.41±0.03)明显(t=-5.543, P<0.05;t=-3.674, P<0.05)。结论 PTEN在GC-1细胞中呈高表达, 其可能通过改变GC-1细胞焦亡水平, 从而影响睾丸IRI的发生发展。

• 单位
  武汉大学人民医院